ПРОГРАММА ПРАКТИКУМА «ЦИТОЛОГИЯ» ДЛЯ СТУДЕНТОВ 1 КУРСА ФАКУЛЬТЕТА ФУНДАМЕНТАЛЬНОЙ МЕДИЦИНЫ

Занятие №1.

 

Теоретическая часть:

Методы клеточной биологии (световая и электронная микроскопия) и разнообразие клеток в организме на примере эпителиальной ткани и клеток крови – говорим о правилах работы с микроскопом, методах световой микроскопии (темное поле, фазовый контраст, DIC, флуоресцентная микроскопия)

 

Практическая часть:

1.  СМ/пр-т Эпителий почки кролика

2.   СМ/пр-т Кровь лягушки

3.  ЭМ фото бактериальной клетки

4.  ЭМ фото эукариотической клетки (дрожжи)

 

Занятие №2.

 

Теоретическая часть:

Клеточное ядро. Теория – электронный микроскоп. Принципы культивирования тканей

 

Практическая часть:

1. СМ препарат клеток культуры СПЭВ, интерфазные ядра.

2. ЭМ/фото Ядро из эмбриональной клетки.

3. ЭМ/фото Ядро полихроматофильного эритробласта

4. ЭМ/фото Ядро опухолевой клетки

5. ЭМ/фото Плазмоцит

 

Занятие №3.

 

Теоретическая часть:

Строение хроматина и хромосом. Уровни укладки ДНК. Состав ПХМ – как была сделана фотография, какие белки входят в состав ПХМ

 

Практическая часть:

1.ЭМ/фото ДНК в составе выделенных хромосом по Лэмли – не рисуем

2. ЭМ/фото Нуклеосомы – напыление металлом или негативный контакт

3.ЭМ/фото Элементарная 30 нм фибрилла хроматина

4.ЭМ/фото Выделенная хромосома (целиком, на подложке), высшие уровни укладки

5.ЭМ/фото Периферический хромосомный материал

 

Занятие №4.

 

Теоретическая часть:

Ядрышко. Ядерная оболочка.  Иммуноцитохимия. Синтез и процессинг рРНК,  схема ядерно-цитоплазматического транспорта

 

Практическая часть:

1. ЭМ/фото Ультраструктура ядрышка

2. СМ/фото Локализация ядрышковых белков (В-23, фибрилларин). Метод иммунофлуоресценции.

3. СМ препарат Амплификация ядрышек в созревающих ооцитах трески.

4. ЭМ/фото Рибосомальные гены в диссоциированных ядрышках ооцита

5. ЭМ/фото Ядерная пора – поперечный и тангенциальный срез – не рисуем! Метод замораживания-скалывания.

 

Занятие №5.

 

Теоретическая часть:

Митотические хромосомы. Рассказываем, как делают препараты кариотипа. Техника FISH – максимально подробно. Альтернативные методы окрашивания

 

Практическая часть:

1. СМ/пр-т Кариотип. Метод раскапывания. Рутинная окраска хромосом.

2. СМ/фото Кариотип человека. Дифференциальное окрашивание.

3. СМ/фото С-окрашивание, Q-окрашивание  дифференциальное окрашивание.

4. Политенная хромосома из ядер Бальбиани

 

Занятие №6.

Коллоквиум

 

Занятие №7.

 

Теоретическая часть:

Плазматическая мембрана. Полное занятие по межклеточным контактам

 

Практическая часть:

1.СМ/фото Щеточная каемка в кишечном эпителии аскариды

2.ЭМ/фото Клеточные контакты в кишечном эпителии

3.ЭМ/фото Плотный контакт (срез, метод замораживания-скалывания)

4.ЭМ/фото Десмосома

5.ЭМ/фото Щелевой контакт (срез замораживания-скалывания) – не рисуем

6. Схема межклеточных контактов из Альбертса –не рисуем

 

Занятие №8.

 

Теоретическая часть:

Повторяем этапы трансляции, биосинтез углеводов и липидов

 

Практическая часть:

1.ЭМ/фото Гранулярный ЭПР

2.ЭМ/фото Гладкий ЭПР

3.СМ препарат  Гликоген в клетках печени

4.ЭМ/фото Гранулы гликогена

 

Занятие №9.

 

Теоретическая часть:

Транспорт и адресация белков. Лизосомы.

 

Практическая часть:

1. СМ/пр-т Аппарат Гольджи в спинальном ганглии

2. СМ/фото Аппарат Голджи в клетках культуры, иммуноцитохимия 3. ЭМ/фото Аппарат Гольджи – полярность и компартменты

4. ЭМ/фото Лизосомы

 

Занятие №10.

 

Теоретическая часть:

Мейоз – фазы,  сперматогони/оогонии, принципы кроссинговера и конъюгации

 

Практическая часть:

1. СМ/пр-т Мейоз в семенных канальцах саранчовых

2. СМ/фото Стадии мейоза

3. СМ/фото Зиготена, пахитена

4. ЭМ/фото Строение синаптонемного комплекса

 

Занятие №11.

 

Теоретическая часть:

Гликолиз. Окислительное фосфорилирование. Принципы окрашивания мтх – разные красители!

 

Практическая часть:

1. СМ/фото Митохондрии – окраска родамином и митотрекером

2. ЭМ/фото Ультраструктура митохондрий в поперечно-полосатой мышце

3. ЭМ/фото Грибовидные тельца, АТФ-синтетаза (метод негативного контраста).

4. ЭМ/фото Капли жира в клетках печени

 

Занятие №12.

 

Теоретическая часть:

Cаркомер. Схема строения кортикального актина. Промежуточные филаменты - классы

 

Практическая часть:

1. СМ/фото Иммуноцитохимическое выявление актиновых филаментов (антитела к актину, миозину)

2.СМ/фото Иммуноцитохимическое выявление и промежуточных филаментов (антителами к виментину или кератину)

3.ЭМ/фото Элементы цитоскелета

4.ЭМ/фото Саркомер

 

Занятие №13.

 

Теоретическая часть:

Центриоль – белки. Схема репликации центриолей в кц. Отличия реснички и жгутика, строение бактериального жгутика.

 

Практическая часть:

1.СМ/фото  Иммуноцитохимическое выявление микротрубочек (антителами к тубулину) – не рисуем!!!

2.ЭМ/фото Строение центриолей и центросомы в интерфазе (ЦОМТ)

3.ЭМ/фото  Строение реснички и жгутика

4.ЭМ/фото Базальные тела, процесс образования реснички

5. Схема поведения центросомы в клеточном цикле  - не рисуем

 

Занятие №14.

 

Теоретическая часть:

Механизмы движения хромосом в митозе, цитокинез у животных

 

Практическая часть:

1.СМ/пр-т Стадии митоза в животной клетке – препарат клеток культуры СПЭВ.

 2.СМ/фото Стадии митоза в пневмоцитах тритона (иммуноцитохимия)

3.ЭМ/фото Клеточный центр в митозе

4.ЭМ/фото Цитокинез

5.ЭМ/фото или схема Строение кинетохора

 

Занятие №15.

 коллоквиум

 

Занятие №16.

 

Теоретическая часть:

Три пути апоптоза. Другие варианты клеточной гибели. Таблица сравнение апоптоза и некроза

 

Практическая часть:

1. СМ/фото Апоптоз в клетках СПЭВ

2. ЭМ/фото Апоптоз в культуре клеток (кариопикноз, кариорексис)

3. ЭМ/фото Сканирующая микроскопия, Блеббинг

4.ЭМ/фото Некроз (кариолизис) –не рисуем!!!

5. Схема вариантов клеточной гибели – не рисуем